分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：

　　(1)200～400nm的紫外光区。

　　(2)400～760nm的可见光区。

　　(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。

　　所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。

　　仪器组成

　　紫外可见光分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

　　仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

　　光谱范围

　　紫外可见光分光光度计包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200～400 nm的紫外光区.不同的光源都有其*的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.

　　钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400～760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红橙,黄绿,蓝靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源.

　　氢灯（或氘灯）的发射光谱:氢灯能发出185～400 nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源.

　　物质的吸收光谱

　　如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.

　　不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。