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- 紫外可见光分光光度计仪器常见主要指标
- 点击次数:2993 更新时间:2018-03-20
- 紫外可见光分光光度计等仪器常见主要指标参数如下:1. 光学系统:一般是指光学系统的结构形式,目前,国内光度计行业常采用的结构为自准式和CT式两种;2. 波长范围:是指光度计所能进行测试的波长zui大值和zui小值之差;3. 波长准确度:仪器显示波长与真实波长的接近程度,即仪器设定波长与实际波长的差值。每台光度计都要在很多个波长点检查波长准确度;4. 波长重复性:波长重复性是仪器返回原波长的能力。它体现了波长驱动机械和整个仪器的稳定性;5. 光谱带宽(灵敏度,分辨力):指一个尖峰光谱带通过单色器出狭缝时,在检测器上所检测到的能量半宽度,用波长单位nm表示,从另一个角度理解这一概念会更通俗易懂:首先,单色器出狭缝不仅仅代表着狭缝的物理尺寸或几何尺寸,他还代表着光学意义,这就是光谱带宽,我们知道,来自单色器的光线不全是单一波长的光,而是一个狭窄的按波长大小顺序排列的光谱带,这一光谱带包含波长的多少,用光谱带宽来表示。光谱带宽直接反应的是从单色器出来的光的单色性的好坏程度。该指标与紫外可见光分光光度计的分辨力和灵敏度很相似,但又有所不同,他们从不同的侧面反应光度计性能的好坏。分辨力是指仪器分辨两相邻波长大小的能力,假如,在相邻两波长处给仪器的输入端两个脉冲输入,在仪器的检测器上检测到的模拟信号,若信号的zui小值低于zui大值的80%,根据罗雷(Rayleigh)判据,就认为这两个波长是可分辨的。实际测量时通常是用苯蒸气来测量(258.9nm和259.3nm间峰谷)。灵敏度是指在做低浓度测量时,当浓度改变一个单位时在检测器上所引起信号的变化量,它受校正曲线(标准曲线浓度为横轴,吸光度为纵轴)和仪器本身精密度的限制。两种测量方法精密度相同时,校正曲线斜率越大越灵敏,而斜率相等时,精密度越高灵敏度越好。需要指出的是,为了得到准确的测试结果,仪器的光谱带宽(Spectral Bandwith简称SBW)和分析样品的自然带宽(Natural Bandwidth 简称NBW)之比应小于0.1 , 这样可以得到99.5% 以上的测量准确度;6.杂散光:杂散光是非选择波长的光照射到检测器上产生的信号,是光度计分析误差的一个重要来源,杂散光大会限制高浓度溶液分析的准确性。杂散光用T%表示;7. 光度范围:指光度计在满足各项技术指标下的测试范围,用A或T表示;8. 光度准确度(Photometric accuracy):指多次测定的平均值与真实值符合的程度;9. 光度重复性(Photometric precision):指在相同的条件下进行多次平行测定,各平行测定结果之间的符合程度;10. 基线平直度:指全波长范围内仪器噪声的分布;11. 飘移:指仪器随时间推移偏离起始值的程度。它取决于光源的稳定性,电气器件的稳定性等。对单光束仪器而言,开机预热时间长短对漂移有很大影响;12. 噪声:指仪器检测到的非有用信号的总和,它是相对信号而言的。一般,分光光度计中的噪声有两个来源,一是来自于光源,二是来自于仪器内部固有的电子噪声,如:电源,放大器,AD转换器等。要减少噪声,提高信噪比,必须有一个良好的电气设计。噪声影响低浓度测试下的测量重复性,也影响测试准确度,噪声可通过多次测量后取平均值部分消除。定量分析是紫外可见光分光光度计应用中的zui主要用途。这里简要介绍7种定量分析方法:(1)法 目前,法是紫外可见光分光光度计诸多分析方法中使用zui多的一种方法。(2)标准法(3)比吸收系数法 比吸收系数法多用于测定样品溶液的浓度。但是,根据比耳定律,被测试样溶液的浓度与吸光度应呈直线关系,而在实际测试中,如果试样的浓度较高时,会发现实际测量到的吸光度值偏离线性关系。这种偏离比耳定律的原因,是由于紫外可见分光光度计的杂散光、噪声、基线平直度和光谱带宽,以及试样的前处理、试样的化学平衡等所引起的。因此,一般情况下,不采用这种方法。(4)标准曲线法 紫外可见光分光光度计zui常用的定量分析方法是标准曲线法。首先,用标准物质配制一定浓度的溶液,然后,将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标,标准溶液对应的浓度值为横坐标,绘制标准曲线。zui后,将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。(5)zui小二乘法 zui小二乘法实际上也就是回归方程法。因为,分光光度法中试样的吸光度A与试样的浓度C之间的关系可用一条直线来描述。即c=aA+b(o、6为常数)。应注意两点:①回归方程是在特定条件下求得的,不能随便套用;②分光光度法中试样的吸光度A与试样的浓度c之间的关系,应建立在回归方程中的取值范围内,否则,不能随便外推。(6)解联立方程法 解联立方程法只适用于两个以上、在紫外区吸收峰互不重叠组分的测定,也不是常用的方法。(7)示差分光光度法 不差分光光度法也不是紫外可见分光光度计应用中常用的方法。应注意三点:①示差分光光度法中zui重要的是选择适当浓度的参比溶液,参比溶液越接近样品溶液,则测定的结果就越准确;②示差分光光度法解决了普通分光光度法中不适用的高含量或痕量物质的分析问题;③示差分光光度法要求紫外可见光分光光度计的稳定性好、灵敏彦高(噪声小、杂散光小)。