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- 紫外分光光度计
- 紫外分光光度计
- 1.紫外分光光度计工作原理
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法对这些物质分别进行测定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长一定时，溶液的吸光度A是吸光物质的浓度C及吸收介质厚度l(吸收光程)的函数。
首先确定实验条件，并在此条件下测得标准物质的吸收峰以及其对应波长值(同时可获得该物质的大吸收波长)；再在选定的波长范围内(或大波长值处)，分别以(不同浓度)标准溶液的吸光度和溶液浓度为横、纵坐标绘出化合物溶液的标准曲线得到其所对应的数学方程；接着在相同实验条件下配制待测溶液，测得待测溶液的吸光度，后用已获得的标准曲线方程求出待测溶液中所需测定的化合物的含量。
凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。
2.常见类型
紫外可见分光光度计
技术指标
波长范围：190-900nm
光谱带宽：1.0
波长准确度：±0.1nm(D2656.1nm)，±0.3nm全区域
波长重复性：≤0.1nm
杂散光：≤0.03%T
光度准确度：±0.2%T
光度重复性：0.1%T
稳定性：0.0004A/h(500nm处)
基线平直度：±0.001A
数据输出：USB接口
打印输出：并行口
光度显示范围：0-200%T、-4-4A、0-9999C(0-9999F)
显示系统：320*240位点阵高亮背光大屏幕LCD液晶显示器
软件：标配
灯源：进口氘灯、钨灯
接收器：进口硅光二极管
外形尺寸：460*380*220mm
重量：20kg
仪器特点
1、320*240位点阵高质量大屏幕液晶显示器，显示清晰，信息完备，充分考虑人性化设计
2、强大的数据处理功能，使实验结果能得到充分的应用，使用户编辑更为简单快捷
3、主要元件采用进口配置，使精度更高、速度更快、可靠性更强、兼容性更广、自动化程度更高
4、丰富的应用功能，使用户随心所欲，应用更灵活、开放，使分光光度计的应用领域得到了极大的拓展
5、高自动化程度，使维护方便、操作简便、效率更高
大屏幕液晶LCD主机显示功能
光度测量：选定波长下吸光度、透过率、浓度的测试
定量测量：标准曲线法、系数法、单波长法、双波长法、多波长法
光谱扫描：多样品进行全波段扫描，找出大吸收峰值
动力学测试：选定波长下测试样品浓度随时间的变化趋势
多波长测试：自由选定多个波长，自动测出样品在多个波长下的吸光度和透过率值
DNA/蛋白质测试：测试DNA/蛋白质的浓度和比率
自动功能：波长误差的自动修复、滤光片切换的自动定位、氘灯和钨灯的自动切换
其他功能：光谱导数、光谱平滑、数据导出、灯源自动控制、支持自动样品池架及其它附件、配有数据口可实现联机操作、数据存储和调用、断电保持和系统应用功能丰富的扫描软件功能：光度分析、定量分析、光谱分析、动力学分析、多波长测试、DNA/蛋白质测试、系统应用。
3.校正方法
紫外分光光度计的校正方法：分光光度法的重要的一个物理化学量是吸光度。为了获得准确的研究结果，准确测得样品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析结果的不可靠性与偶然误差和系统误差有关。偶然误差影响测量的精密度，可通过足够数量测量的统计处理来减少;系统误差影响测量结果的准确度，可在大体相同实验条件下，用比较一种物质的准确测量结果，使系统误差统一起来。而分光光度计的系统误差(波长校正、分光光度计的慢散光、放大器的线性响应、暗电流和比色皿的光程)和操作误差(温度改变、仪器读数、操作者的改变、使用物质的纯度、称量和浓度、pH)对测量吸光度的影响是可以检查和校正的。关于操作误差，多数情况下，通过严格按操作程序测量、仪器调零、准确称量等来控制或减少这种误差的产生。关于仪器的系统误差，可通过对分光光度计的定期校正来克服，若所需准确度很高的测量，则必须天天校正。